프로테옴 분석에 의한 멜라닌 형성억제 메커니즘 분석방법 연구

Abstract

본 연구에서는 미백에 효과적인 물질들이 어떠한 기작에 의해 melanin 형성을 저해하는 지에 대하여 알아보는 방법으로 2-DE를 사용하고자 하였다. 먼저 돌외 에탄올 추출물을 얻은 후 세포 독성 시험과 melanin 함량 측정을 통하여 미백에 효과가 있는지 알아보았다. 그 후 돌외 추출물을 처리한 melanocyte와 처리하지 않은 melanocyte의 전체 proteome을 2-DE를 사용하여 비교한 후 분석하였다. 그 결과 spot volume이 2배 이상 차이가 나는 spot들 을 여러 melanin 형성 관련 protein들과 matching할 수 있었고, 돌외의 melanin 형성 기작을 추론하여 볼 수 있었다. 이러한 2-DE를 이용한 미백 기작 연구방법을 바탕으로 melanin 형성 억제 능력이 아주 뛰어난 것으로 알려진 산뽕나무 심재 추출물의 기작을 연구하였다. 먼저 산뽕나무의 에탄올 추출물을 얻은 후 melanocyte에 처리하여 처리하지 않은 melanocyte와 proteome을 비교하였다. Gel image 분석 후 melanin 형성 관련 protein들과 matching 되는 spot을 선정하여 MALDI-TOF를 통해 mass 분석을 하였다. 그 결과 melanogenesis 와 관련 있는 protein들을 동정 할 수 있었고, 이런 protein들의 melanin 형성에 대해 알려져 있는 역할들을 토대로 산뽕나무 심재가 어떠한 기작에 의해 미백효능을 나타내는지 추론하여 볼 수 있었다.