Naegleria fowleri의 분비-배설 단백질의 특성 분석

Abstract

병인(Pathogen)의 동정은 원발성 아메바성 수막뇌염을 일으키는 파울러자유아메바(Naegleria fowleri)의 병원성을 이해하는데 중요하다. 여러 연구에서 원충류로부터 분비배설된 다양한 단백질들이 병원성과 관련있다고 보고되어 있다. 파울러자유아메바의 분비배설단백질(excretory-secretory proteins, ESPs) 중 병원성과 관련된 요인을 찾고자 본 연구에서는 파울러자유아메바의 분비배설단백질의 구성 양상을 SDS-PAGE와 2차원 전기영동법 (2-dimensional electrophoresis)으로 분석하였다. BALB/c 마우스 복강에 파울러자유아메바의 분비배설단백질을 면역시켜 항-ESPs 항체를 얻었으며, 또한 파울러자유아메바의 영양형을 감염시켜 감염 혈청을 얻었다. 얻어진 항-ESPs 항체와 감염 혈청으로 SDS-PAGE와 2차원 전기영동 후 Western blot 분석법을 시행하여 분비배설단백질 중 항원성이 높은 단백질들을 찾을 수 있었다. 선별된 ESPs 단백질들은 유전자들을 동정하고자 N-terminal sequencing을 시행하였다. 그 결과, 58, 40, 24, 21, 18, 16 kDa의 단백질들을 동정하였으며, 각각 secreted effector protein, secretory lipase, cathepsin B-like protease, cysteine protease, cathepsin B, peroxiredoxin, thrombin receptor 등과 높은 상동성을 보였다. 동정된 각각의 단백질들의 역할들과 관련지어 볼 때, 파울러자유아메바의 분비-배설단백질들은 파울러자유아메바가 숙주세포에 침입하거나 숙주세포로부터 아메바를 보호하는데 관여하는 중요한 요인으로 작용할것이라 생각된다.