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사람 T 세포주에서 종양세포 배양액에 의한 TIM-3 발현 증가
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | 박선 | - |
| dc.contributor.author | 윤수진 | - |
| dc.date.accessioned | 2019-10-21T07:30:10Z | - |
| dc.date.available | 2019-10-21T07:30:10Z | - |
| dc.date.issued | 2017-02 | - |
| dc.identifier.other | 24675 | - |
| dc.identifier.uri | https://dspace.ajou.ac.kr/handle/2018.oak/19030 | - |
| dc.description | 학위논문(박사)--아주대학교 일반대학원 :의생명과학과,2017. 2 | - |
| dc.description.tableofcontents | ABSTRACT •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• ⅰ TABLE OF CONTENTS •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• ⅲ LIST OF FIGURES ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• ⅴ Ⅰ. INTRODUCTION •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 1 A. TIM-3 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 1 B. Cyclic adenosine monophosphate (cAMP) signaling ••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 5 C. Prostaglandin E2 (PGE2) •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 8 D. Purposes of this research •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 11 Ⅱ. MATERIALS AND METHODS ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 12 A. Cell culture chemical treatment •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 12 B. SDS-PAGE and Western blotting ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 13 C. RNA isolation and cDNA synthesis •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 13 D. Real-time RT-PCR •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 14 E. PGE2 measurement ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 14 F. Plasmid construction and luciferase reporter assay ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 15 G. siRNA transfection ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 16 H. Statistical analysis ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 16 Ⅲ. RESULTS •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 17 Ⅳ. DISCUSSION ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 39 Ⅴ. CONCLUSION •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 47 REFERENCES •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 48 국문요약 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 64 | - |
| dc.language.iso | eng | - |
| dc.publisher | The Graduate School, Ajou University | - |
| dc.rights | 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다. | - |
| dc.title | 사람 T 세포주에서 종양세포 배양액에 의한 TIM-3 발현 증가 | - |
| dc.title.alternative | Su Jin Yun | - |
| dc.type | Thesis | - |
| dc.contributor.affiliation | 아주대학교 일반대학원 | - |
| dc.contributor.alternativeName | Su Jin Yun | - |
| dc.contributor.department | 일반대학원 의생명과학과 | - |
| dc.date.awarded | 2017. 2 | - |
| dc.description.degree | Doctoral | - |
| dc.identifier.localId | 770710 | - |
| dc.identifier.url | http://dcoll.ajou.ac.kr:9080/dcollection/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000024675 | - |
| dc.subject.keyword | TIM-3 | - |
| dc.subject.keyword | tumor microenvironment | - |
| dc.subject.keyword | cAMP | - |
| dc.subject.keyword | PKA | - |
| dc.subject.keyword | Epac | - |
| dc.subject.keyword | PGE2 | - |
| dc.description.alternativeAbstract | T cell immunoglobulin- and mucin-domain-containing molecule-3 (TIM-3) is well known as one of the immune check point molecules. TIM-3 expressed on Th1 cells negatively regulates Th1 cell functions. TIM-3 expression is induced on exhausted T cells and senescent T cells in various diseases including autoimmune diseases, inflammatory diseases and cancers. However, the regulatory mechanism of TIM-3 expression in immune disorders has not been explored. Therefore, I wanted to investigate the regulatory mechanism of TIM-3 expression in a human T cell line cultured in the condition mimicking tumor microenvironment. TIM-3 mRNA and protein levels were promoted in Jurkat T cells cultured in tumor cell conditioned media (CM) or stimulated with agent elevating intracellular cyclic adenosine monophosphate (cAMP) concentration. Activation of protein kinase A (PKA) and exchange protein directly activated by cAMP (Epac), molecules involved in cAMP downstream pathway, also increased TIM-3 expression in Jurkat T cells. Especially, inhibition of PKA pathway attenuated tumor CM-induced TIM-3 expression as well as cAMP-induced TIM-3 expression. Prostaglandin E2 (PGE2) which elevates intracellular cAMP levels, increased in tumor CM and slightly up-regulated TIM-3 expression in Jurkat T cells, however, tumor CM- induced TIM-3 expression was not affected by treatment with antagonist to PGE2 receptors. On the other hand, cAMP responsiveness of TIM-3 minimal promoter was shown. Collectively, this study demonstrates that TIM-3 expression is enhanced by incubation of Jurkat T cells in tumor CM or activation of cAMP/PKA/Epac pathway. These results provide insights to the regulation of TIM-3 expression in tumor and these insights could serve as the foundation for developing an approach for regulation of TIM-3 expression. | - |
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- Graduate School of Ajou University > Department of Biomedical Sciences > 4. Theses(Ph.D)
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