신경계에서 Id단백질의 역할 및 NeuroD 단백질의 수명 조절

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dc.contributor.advisor서해영-
dc.contributor.authorJung, Seunghwan-
dc.date.accessioned2019-10-21T07:13:52Z-
dc.date.available2019-10-21T07:13:52Z-
dc.date.issued2010-02-
dc.identifier.other10677-
dc.identifier.urihttps://dspace.ajou.ac.kr/handle/2018.oak/17535-
dc.description학위논문(박사)--아주대학교 일반대학원 :신경과학기술과정,2010. 2-
dc.description.tableofcontentsABSTRACT ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• •i TABLE OF CONTENTS •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• •••••••••••••iii LIST OF FIGURES •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••vi LIST OF TABLES ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• ••••••••••••viii I. INTRODUCTION•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••1 II. MATERALS AND METHODS A. Construction of plasmids•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••5 B. Cell culture and transfection assay••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••5 C. Immunocytochemistry•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••6 D. Luciferase assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 6 E. Neural stem cells•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 F. Electrophoretic mobility super shift assay (EMSA) •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 G. Western analysis•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 H. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) ••••••••••••••••••••••••8 I. Neurite outgrowth assay••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 J. In situ hybridization••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 K. Bromodeoxyuridine (BrdU) Incorporation Assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 L. In utero electroporation and immunohistochemistry•••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 M. Static analysis•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 N. Ubiquitination assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••11 III. RESULTS••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 PART I. Id proteins facilitate self renewal and proliferation of neural stem cells•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 12 A. Id expression correlates with stemness of NSCs•••••••••••••••••••••••••••••••12 B. Id proteins promote self-renewal of NSCs••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 C. Inhibition of E-box mediated gene expression by Id proteins•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••19 D. Overexpression Id proteins inhibit neuronal differentiation in P19 cells and neurite-outgrowth in F11cells•••••••••••••••••••••••••••••••20 E. Id proteins are expressed in proliferating cells•••••••••••••••••••••••••••••••••25 F. Id proteins increase the proliferating neural precursors in the developing brain•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••25 PART II. Posttranslational modification of NeuroD•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••32 A. NeuroD is a short-lived protein that is degraded in the cell by the ubiquitin-proteasome-pathway••••••••••••••••••••••••••••••••32 B. NeuroD is degraded by the ubiquitin proteolytic system in vitro•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••32 C. C-terminus of NeuroD is a critical site degraded by the ubiquitin proteolytic system in vitro••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 D. Phosphorylation of NeuroD regulates its stability••••••••••••••••••••••••••••••••38 E. S266 and S274 site are important in NeuroD stability•••••••••••••••••••••••••38 IV. DISCUSSION •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 41 V. CONCLUSION•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••45 REFERENCES••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••46 국문요약•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 55-
dc.language.isokor-
dc.publisherThe Graduate School, Ajou University-
dc.rights아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.-
dc.title신경계에서 Id단백질의 역할 및 NeuroD 단백질의 수명 조절-
dc.title.alternativeRoles of Id Proteins in the Development of the Nervous System and Regulation of the NeuroD Protein Stability-
dc.typeThesis-
dc.contributor.affiliation아주대학교 일반대학원-
dc.contributor.department일반대학원 신경과학기술과정-
dc.date.awarded2010. 2-
dc.description.degreeMaster-
dc.identifier.localId568596-
dc.identifier.urlhttp://dcoll.ajou.ac.kr:9080/dcollection/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000010677-
dc.subject.keywordId-
dc.subject.keywordNeuroD-
dc.subject.keywordNSC-
dc.subject.keywordstem cell-
dc.subject.keywordubiquitination-
Appears in Collections:
Graduate School of Ajou University > Department of Neuroscience and Technology Course > 3. Theses(Master)
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