신경계에서 Id단백질의 역할 및 NeuroD 단백질의 수명 조절
DC Field | Value | Language |
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dc.contributor.advisor | 서해영 | - |
dc.contributor.author | Jung, Seunghwan | - |
dc.date.accessioned | 2019-10-21T07:13:52Z | - |
dc.date.available | 2019-10-21T07:13:52Z | - |
dc.date.issued | 2010-02 | - |
dc.identifier.other | 10677 | - |
dc.identifier.uri | https://dspace.ajou.ac.kr/handle/2018.oak/17535 | - |
dc.description | 학위논문(박사)--아주대학교 일반대학원 :신경과학기술과정,2010. 2 | - |
dc.description.tableofcontents | ABSTRACT ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• •i TABLE OF CONTENTS •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• •••••••••••••iii LIST OF FIGURES •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••vi LIST OF TABLES ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• ••••••••••••viii I. INTRODUCTION•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••1 II. MATERALS AND METHODS A. Construction of plasmids•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••5 B. Cell culture and transfection assay••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••5 C. Immunocytochemistry•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••6 D. Luciferase assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 6 E. Neural stem cells•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 F. Electrophoretic mobility super shift assay (EMSA) •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 G. Western analysis•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 H. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) ••••••••••••••••••••••••8 I. Neurite outgrowth assay••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 J. In situ hybridization••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 K. Bromodeoxyuridine (BrdU) Incorporation Assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 L. In utero electroporation and immunohistochemistry•••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 M. Static analysis•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 N. Ubiquitination assay•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••11 III. RESULTS••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 PART I. Id proteins facilitate self renewal and proliferation of neural stem cells•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 12 A. Id expression correlates with stemness of NSCs•••••••••••••••••••••••••••••••12 B. Id proteins promote self-renewal of NSCs••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 C. Inhibition of E-box mediated gene expression by Id proteins•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••19 D. Overexpression Id proteins inhibit neuronal differentiation in P19 cells and neurite-outgrowth in F11cells•••••••••••••••••••••••••••••••20 E. Id proteins are expressed in proliferating cells•••••••••••••••••••••••••••••••••25 F. Id proteins increase the proliferating neural precursors in the developing brain•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••25 PART II. Posttranslational modification of NeuroD•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••32 A. NeuroD is a short-lived protein that is degraded in the cell by the ubiquitin-proteasome-pathway••••••••••••••••••••••••••••••••32 B. NeuroD is degraded by the ubiquitin proteolytic system in vitro•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••32 C. C-terminus of NeuroD is a critical site degraded by the ubiquitin proteolytic system in vitro••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 D. Phosphorylation of NeuroD regulates its stability••••••••••••••••••••••••••••••••38 E. S266 and S274 site are important in NeuroD stability•••••••••••••••••••••••••38 IV. DISCUSSION •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 41 V. CONCLUSION•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••45 REFERENCES••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••46 국문요약•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 55 | - |
dc.language.iso | kor | - |
dc.publisher | The Graduate School, Ajou University | - |
dc.rights | 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다. | - |
dc.title | 신경계에서 Id단백질의 역할 및 NeuroD 단백질의 수명 조절 | - |
dc.title.alternative | Roles of Id Proteins in the Development of the Nervous System and Regulation of the NeuroD Protein Stability | - |
dc.type | Thesis | - |
dc.contributor.affiliation | 아주대학교 일반대학원 | - |
dc.contributor.department | 일반대학원 신경과학기술과정 | - |
dc.date.awarded | 2010. 2 | - |
dc.description.degree | Master | - |
dc.identifier.localId | 568596 | - |
dc.identifier.url | http://dcoll.ajou.ac.kr:9080/dcollection/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000010677 | - |
dc.subject.keyword | Id | - |
dc.subject.keyword | NeuroD | - |
dc.subject.keyword | NSC | - |
dc.subject.keyword | stem cell | - |
dc.subject.keyword | ubiquitination | - |
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